实验动物猪1000例麻醉的应用研究

周立才 张秀兰 石晶 王利娜 金大庆 李卫民

(首都医科大学平谷教学医院，北京 平谷 101200)

【摘要】：目的：通过本中心1000例的实验动物猪的麻醉，总结出一种猪实用的麻醉方法。方法：对本中心4年来共1000例猪选用咪达唑仑0.1-0.2mg/kg及速眠新0.25—0.3ml/kg复合肌注诱导镇静，琥珀酰胆碱、地西泮注射液、利多卡因加入到平衡液中配成麻醉混合液缓慢静脉滴注维持的方法实现对猪耐受各种手术的麻醉。结果：6例猪在麻醉过程中由于操作不当，于气管插管前后不幸死亡，1例死于氧气供给缺乏，9例死于术中大出血，其余猪均顺利维持到手术结束。结论：速眠新和地西泮复合用药，用于猪的麻醉是非常经济、实用的，有很好的应用价值。

【关键词】：猪;实验动物;麻醉

【Abstract】: Objective: through the experimental animal center of anesthesia in 1000 cases of swine, summarized the anaesthesia method of pig practical. Methods: the center for 4 years a total of 1000 cases of swine using midazolam 0.1—0.2mg/kg and Sumianxin 0.25—0.3ml/kg intramuscular injection induced sedation, succinylcholine, diazepam injection, lidocaine was added to the equilibrium liquid with method of anesthesia mixture slow intravenous infusion to maintain the pig tolerance of various operation anesthesia. Results: 6 cases of swine during anesthesia due to improper operation, in the before and after tracheal intubation, died, 1 cases died from lack of oxygen supply, bleeding in 9 cases died during operation, the remaining pigs were successfully maintained to the end of operation. Conclusion: Sumianxin and diazepam combined with medication, for the pig anesthesia is very economical, practical, has the good application value.

【Keywords】: Pig; animal experiment; anesthesia

随着医学技术的迅猛发展，各种新的仪器设备及新的手术方式在向临床不断的推广，在这些设备及技术运用到临床推广之前通常要在实验动物上模拟真实的手术，用以验证可行性及可操作性。我中心自2009年4月至今的四年中，开展了外科腹腔镜培训班40多期，消化内镜及心脏介入的培训班30多期，协助外院完成医学课题研究40多项。各种实验动物麻醉近2000例，其中实验用猪的麻醉已经超过了1000例，从中总结了对动物猪麻醉的一些麻醉原则、方法、注意事项，现介绍如下。

1 材料与方法

1.1实验动物：本中心2009年4月——2013年4月的四年间麻醉的实验用猪共计1000头，3—24个月，均为雌性，体重40±20kg，临床检查健康，由北京市房山区琉璃河实验用猪场购入。在同一环境下饲养3—7天再进行实验。

1.2 实验器械和药品：实验器械有麻醉机、监护仪、麻醉床、喉镜、听诊器及其它常用的物品。实验药品包括阿托品、地塞米松、咪达唑仑、速眠新、琥珀酰胆碱、地西泮注射液、利多卡因等。

1.3 实验方法：实验动物和实验人员麻醉前均做好充分的准备，麻醉过程中注意实验动物的生理反应和生命体征变化。

1.3.1 麻醉前的准备

1.3.1.1 实验动物的术前准备：根据不同的实验操作选择合适的实验动物。一般做腹腔镜手术的猪需要15-20KG左右，这样的猪体内各个器官已经基本发育完全，体型偏小有利于腹腔镜器械的操作。而行心脏介入的猪最好为50KG以上，以便术者更好的寻找目标血管以及在该血管中进行手术操作。术前禁食水是术前至关重要的环节。通常情况下要做到实验前对猪禁食6-8小时，禁水2小时，以保证其胃部的空虚，防止充满食物的胃压迫膈肌而影响猪的呼吸1。同时防止猪的呕吐及误吸。不仅有利于气管插管的操作，同时也提高了实验动物操作的安全性。如果需要进行胃肠镜手术，则至少需要禁食72小时，禁水12小时，以充分达到胃排空的目的，有利于术中暴露清晰的视野。同时，术前尽量将实验动物单笼饲养(见图1)，每天定期进行笼舍的清理。不仅可以避免猪产生的大量污染物影响手术室的环境卫生，同时在一定程度上提高了术中无菌环境的程度。

1.3.1.2 麻醉人员的术前准备：作为麻醉工作者，术前必须掌握实验动物的一般情况，根据猪的身体状况调节麻醉药剂量，对体弱猪适量减少麻醉用药。麻醉前应穿戴合适的手术衣、帽子、口罩、无菌手套，做好自身的防护。根据所要实施的手术制定合理的麻醉方案，准备所需要的麻醉仪器、设备、药品等。

1.3.1.3麻醉物品的术前准备： 实验仪器准备：麻醉机、监护仪、吸引器各一台，术前检查连接正确，性能良好无漏气。检查氧气气源是否充足，钠石灰是否变色，变色时及时更换，以免造成CO2蓄积中毒。插管准备：喉镜、管芯、气管导管、吸痰管、注射器、牙垫、舌钳、听诊器、简易呼吸器等。猪的气管导管较细，一般体重在25KG一下的猪选择直径小于6mm的气管导管，50KG的猪选用内奸为9mm气管导管，而体型较大的猪其导管直径在14-16mm[1]。由于猪的口腔与咽喉间的夹角较小，趋于平行(见图3)，与人的口咽近乎垂直的夹角有明显的差别(见图2)，故本中心特制了直镜，更方便挑起猪的会厌。成年猪的口腔至会厌根部的距离较人的明显长，本中心对喉镜的叶片长度也做了适当的加长(见图4、图5)，更符合猪的咽喉部的生理解剖。

1.3.1.4麻醉诱导药、麻醉维持药及输液用品的准备：术前准备相应的麻醉药品及常用的抢救药物，如阿托品、多巴胺等，放到准备好的盘子内。待猪保定麻醉后开放外周静脉通路，通常选择双下肢作为穿刺点。

1.3.2麻醉诱导阶段

1.3.2.1诱导前给药：麻醉诱导前常规给予肌肉注射阿托品0.5mg和地塞米松10mg，用来减少唾液腺及气管腺体的分泌，防止过敏反应。麻醉诱导药物选用咪达唑仑0.1-0.2mg/kg及速眠新0.25—0.3ml/kg复合用药，观察猪的反应，一般给药5-10分钟后，猪变得安静、闭眼、嗜睡，对外界刺激反应差，其后自行卧地，此时称之为保定麻醉。将诱导麻醉后的猪放置到特制的操作床上(见图6)。取仰卧位，固定四肢于操作床的四角，防止插管过程中猪过分的躁动。

1.3.2.2 诱导后气管插管：尽量伸展其头部和颈部，助手将舌拉出，用两块大纱布分别上下固定上颌骨及鼻腔，防止剧烈的吞咽动作影响插管的操作(见图7)。麻醉师左手持喉镜柄，将喉镜片从口腔一角进入，移至口腔中央，再进喉镜前端达到舌根，挑起会厌显露声门，右手持气管导管对准声门裂，等待猪呼吸过程中声门打开的一瞬间，直接将气管导管通过声带和喉中部的背侧之间向气管内插入(见图8)，判断插管进入气管后给予套囊注气10—15ml。连好麻醉机，调整好参数(呼吸频率15次左右，潮气量12ml/kg)，将牙垫与气管导管用医用胶布固定，防止气管导管滑落脱出。插管时遇阻力可能是声门下狭窄或导管过粗所致，这时要旋转导管或换细导管。猪躁动不安不易插管是由于保定麻醉浅，可静推琥珀酰胆碱，加大肌肉松弛，减少实验动物躁动，待肌颤停止，快速插管。在气管插管的过程中一定要注意避免过分粗暴，以免损伤喉粘膜而导致喉头水肿或在拔除导管后发生呼吸梗塞。

判断气管插管成功的方法：

A、气管导管有湿热气流呼出

B、听两肺呼吸音左右上下均匀一致

C、两侧胸廓同时均匀起伏，无上腹部隆起

1.3.3 麻醉维持阶段

麻醉维持用药是用琥珀酰胆碱6支，地西泮注射液6支，利多卡因7支加入到500ml平衡液中配成麻醉混合液缓慢静脉滴注，先快速滴注5-10ml，待实验动物麻醉完全后，减慢滴速到40-60滴/分钟。术中给予心电监护，随时监测动物的血压、脉搏、血氧浓度的情况，监测动物的生命体征。为了预防动物麻醉过深，麻醉机旁应常规准备抢救药物，如尼可刹米、东莨菪碱、肾上腺素等。对于手术操作时间短，麻醉深度要求不高的动物实验，也可以选用丙泊酚50ml溶于5%的葡萄糖溶液250ml中配成的麻醉混合液缓慢滴注，其麻醉诱导快，维持时间短，恢复较快。但丙泊酚可使外周血管阻力下降、心肌抑制、心输出量减少，对呼吸也有明显的抑制作用，若需静脉注射需在1min内缓慢静推，以避免出现血压下降过快和呼吸暂停现象[2]，同时观察心电监护，注意生命体征变化

1.3.4 麻醉恢复阶段

如果术后的实验动物需要留观，于手术结束前30—40分钟开始停药，继续输液、通气，手术结束后可给予麻醉拮抗剂陆醒宁，剂量为速眠新的1/2。待自主呼吸恢复，通气量足够;咳嗽、吞咽反射恢复;四肢活动频繁;血压、脉搏平稳以后，吸净口、鼻、咽、气管内分泌物后，拔除气管插管，送回动物病房。将其放置在温暖的环境中，避免发展为体温过低。密切观察生命体征，紧急抢救可能发生的呼吸阻塞。缓解动物术后疼痛，必要时采用麻醉性止痛药;在这类药物中，最常用的是吗啡(0.1-20mg/kg)和哌替啶(2mg/kg)1。

2 结果

2.1 麻醉诱导阶段：动物共死亡6例，其中2例死于将麻醉维持液误当平衡液静脉滴入，导致动物肌松后未能及时给予吸氧而窒息而死。另外4例死于将气管插管插入食道，机械通气后胃胀明显却不能及时排除。

2.2 麻醉维持阶段:动物共死亡10例，其中1例死于机械通气后氧气消耗完毕但未及时发现并处理，导致低氧血症而死。另外9例死于术者操作不当，损伤大血管造成大出血而未能充分补液。

2.3 麻醉恢复阶段：术后动物死亡比例较高，大部分因术中造成内脏及组织损伤严重，术后不能耐受而直接处死。部分死于气管插管拔除过早，导致动物缺氧而死。部分因手术伤口感染严重，术后抗炎不充分而死。

3 讨论

动物麻醉是门新兴的、发展迅速的学科。由于动物不能自主反映自身的不适，术后缺乏必要的化验检查及监护手段，因此麻醉的成功与否是决定动物术后转归的关键因素。临床实践中动物的麻醉有许多相似之处，又各有不同。在麻醉药物和麻醉方法的选择上有很多差别需要注意。

根据不同动物实验时间选择麻醉药物 如动物实验需要动物保持较长时间麻醉状态、麻醉程度较深，可选择具有较强镇静催眠作用的戊巴比妥钠，咪达唑仑、地西泮注射液[3];如所需时间较短、麻醉程度较浅，可使用中枢性抑制但作用短效的乙醚，以及对中枢抑制弱、苏醒快的盐酸氯胺酮及速眠新[4]。戊巴比妥钠有降低心率和抑制心肌收缩力的作用，心脏介入手术尽量避免使用[4]。氯胺酮具有较强的药物滥用潜力，属于管制药品，不适于在动物麻醉中广泛使用。

根据不同麻醉途径选择麻醉药物 速眠新、咪达唑仑通过肌肉注射，戊巴比妥钠、盐酸氯胺酮、地西泮注射液需通过静脉注射，而乙醚作为吸入性麻醉剂，通常经过吸入的方式用药，但考虑乙醚有在空气中扩散污染的风险，应尽量减少使用，降低麻醉药品对自身的危害。

复合麻醉药物的选择 复合麻醉可以避免单纯使用一种麻醉药物时麻醉时间过长、麻醉强度过深造成的药物大量蓄积，减少由于药物剂量产生的副作用对机体可能带来的不利因素，有效降低了麻醉风险[6]。

本中心四年来致力于动物实验的研究，积累了许多动物麻醉的实验数据，总结了大量的动物麻醉经验。尤其对猪的麻醉熟练程度、用药规律、操作技巧有着很深的认识。在麻醉诱导阶段，常规应用速眠新作为麻醉诱导剂，与其他药物如戊巴比妥钠等相比，其具有麻醉诱导快、用量节省、用法简单、安全系数高、麻醉效果强、经济效益好的优势[7]，建议在动物实验中推广使用;而在麻醉维持阶段，丙泊酚的维持麻醉应注意药物的副作用，本院自行研制的由琥珀酰胆碱、地西泮注射液、利多卡因配成的麻醉混合液具有麻醉诱导快、安全系数高、节约麻醉成本的优势，建议在动物实验中借鉴使用;麻醉恢复阶段，应注意观察动物术后的各项生理反应，判断恢复情况。避免过早的拔除气管插管造成的动物缺氧造成的窒息及死亡、增加麻醉风险、影响实验效果。

在医学动物实验中，实验动物的麻醉是能否保证实验顺利进行、得到预期结果的重要环节之一。麻醉者是保障动物实验顺利进行的保障者，要在认真掌握麻醉理论和技术的基础上，不断总结经验和教训，并借鉴人类临床麻醉技术，结合其新进展，探索出对动物实验更安全、更有效、更科学的麻醉方法，高质量保障好动物实验的顺利进行。

参 考 文 献

1) 王洪斌.现代兽医麻醉学 .中国农业出版社编印【M】2010:336-344.

2) 廖新权,刘领汉,谢光平等. 丙泊酚在小动物麻醉上的应用简介. 广东畜牧兽医科技【J】, 2011,36(2):45-46.

3) 王占元,杨培梁,刘秋菊等.常用实验动物的麻醉. 中国比较医学杂志【J】,2004,14(2):245-246.

4) 李尧清,杨小玲,秦建琼等. 氯胺酮在实验动物麻醉中的应用分析. 上海实验动物科学【J】, 2001,21(3):169-170.

5) 周昆,屈彩芹. 动物实验常用麻醉剂的比较和选择. 实验动物科学【J】, 2008,25(2):41-43.

6) Gernot M，Kaiser MD，Matthias M. General handling and anesthesia for experimental surgery in pigs【J】. Surgical Research，2006,130(1)：73-79.

7) 文小玲,张平,姜徳诵. 速眠新与戊巴比妥钠在动物麻醉中的应用比较. 南华大学学报医学版【J】, 2004,32(1):131-132.

(收稿日期　20××-××-××)

作者简介：周立才(1984-)男，北京市平谷区医院医师，硕士研究生，主要从事动物麻醉的研究。